虾碱性磷酸酶
应用活性定义储存使用注意事项 专题
中文名称 | 虾碱性磷酸酶 |
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中文同义词 | 虾碱性磷酸酶 |
英文名称 | Shrimp Alkaline Phosphatase,SAP |
英文同义词 | Shrimp Alkaline Phosphatase,SAP |
CAS号 | |
分子式 | |
分子量 | 0 |
EINECS号 | |
相关类别 | 核酸修饰酶 |
Mol文件 | Mol File |
结构式 |
虾碱性磷酸酶 性质
虾碱性磷酸酶 用途与合成方法
应用
DNA 和 RNA 的去磷酸化
防止克隆载体的自连
制备5´末端标记模板
去除 PCR 产物中的 dNTP 和焦磷酸盐
活性定义
1单位指在25℃条件下,30分钟能使1μg经 HindIII(产生5’突出末端)消化的 pUC19 DNA 去磷酸化所需的酶量。去磷酸化标准是指在自连接反应中能抑制>95%的DNA 再连接。
储存
-20℃可保存3年。
使用注意事项
(1)1×SAP Buffer:50 mM Bis-Tris HCl pH 6.0,1mM MgCl2,0.1 mM ZnCl2,25℃ 温育。
(2)热失活:65℃ 加热 5 分钟,不可逆失活。该酶通常用于酶切载体的去磷酸化,因其不可逆热失活特性。当完成去磷酸化反应后,无需再纯化产物,可以直接用于后续连接反应。
(3)虾碱性磷酸酶也可以用来降解PCR反应中的游离dNTP,用于制备测序模板和 SNP 分析。同样无需纯化,可直接用于下游实验。