昆虫基因组DNA提取试剂盒
背景适用范围保存条件纯度检测使用方法 专题
中文名称 | 昆虫基因组DNA提取试剂盒 |
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中文同义词 | 昆虫基因组DNA提取试剂盒 |
英文名称 | Insect genomic DNA extraction kit |
英文同义词 | |
CAS号 | |
分子式 | |
分子量 | 0 |
EINECS号 | |
相关类别 | DNA提取与纯化;基因;基因组提取 |
Mol文件 | Mol File |
结构式 |
昆虫基因组DNA提取试剂盒 性质
昆虫基因组DNA提取试剂盒 用途与合成方法
背景
该试剂盒采用独特的裂解液能够有效除去多糖多酚等,能够从昆虫、软体动物、节肢动物、蛔虫等样品中提取DNA,保存在在醇类的样品也适用于本试剂盒的提取。一次操作可以处理小于50mg组织,样品经裂解液消化,氯仿分离除去大部分的多糖多酚,再经分离柱进一步纯化,便可得到高纯度的DNA。所得的DNA可以用于PCR,Southern杂交,酶切消化等实验。
适用范围
昆虫基因组DNA提取试剂盒专门为从昆虫等低等非脊索动物,包括某些植物组织中提取基因组DNA而设计。该方法结合了CTAB裂解法和硅胶柱纯化方式,能有效地去除各种色素,甲壳素,多糖等杂质。 纯化的DNA可直接用于PCR,Southern杂交,酶切等后续实验
保存条件
室温保存,12个月内有效。缓冲液IL与缓冲液 IB可能有沉淀产生,37℃水浴溶解后即可。RNase A和蛋白酶K常温运输,-20℃保存。
纯度检测
基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。提取的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。可配制0.8-1.0%琼脂糖凝胶,使用λ/HindIII判断基因组的大小,完整的基因组大小应在23kb以上。使用分光光度计检测时, OD260/OD280比值应为1.7–1.9之间,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离子水洗脱,比值可能偏低,但并不表明DNA纯度不高。
使用方法
昆虫组织(细胞)磨碎成粉末后,用CTAB裂解液裂解,氯仿抽提去除多聚糖等物质后,异丙醇沉淀初步纯化DNA,重新溶解DNA加入乙醇调节DNA与柱子的结合条件,过柱进一步纯化DNA,通过两步快速地洗涤柱子以去除杂质,最后用灭菌水或低盐缓冲液溶解并洗脱出DNA。