虎红琼脂培养基
简介配方检验原理使用方法 专题
中文名称 | 虎红琼脂培养基 |
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中文同义词 | 虎红琼脂培养基 |
英文名称 | Rose bengal agar medium |
英文同义词 | |
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分子量 | 0 |
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相关类别 | |
Mol文件 | Mol File |
结构式 |
虎红琼脂培养基 性质
虎红琼脂培养基 用途与合成方法
简介
虎红琼脂培养基也叫做孟加拉红培养基用于霉菌和酵母的计数、分离和培养用。
配方
(每升孟加拉红培养基(虎红琼脂)):蛋白胨5g;葡萄糖10g;磷酸二氢钾1g;硫酸镁0.5g;琼脂15g;孟加拉红0.03g;氯霉素0.1g;最终pH 7.2±0.2。
检验原理
蛋白胨在培养基中作为营养物质提供菌体生长所需氮源等;葡萄糖作为能源;磷酸盐作为缓冲剂;镁盐促进菌体细胞的生长;孟加拉红可抑制细菌的生长,也可限制繁殖快的霉菌菌落的大小和高度,此外还作为着色剂,霉菌或酵母菌吸收后便于菌落的观察;氯霉素为抗生素可抑制细菌的生长;琼脂作为凝固剂。
用法:称取本品36.6g,加热溶解于1000ml纯化水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟备用。
使用方法
1、称取孟加拉红培养基31.6g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌20min。
2、无菌操作称取检样25克(或25mL),放入含有225mL灭菌水的玻璃三角瓶中,振摇30min,即为1:10稀释液,依次做1:100、1:1000……稀释。
3、根据对样品污染情况的估计,选择2—3个合适的稀释度,分别在做10倍稀释的同时,吸取1mL稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做2个平皿。
4、将凉至45℃左右的培养基注入平皿中,待琼脂凝固后,倒置于25—28℃温箱中培养。
5、3d后开始观察结果,共培养观察5d。
6、计算方法:通常选择菌落数在10—150之间的平皿进行计数(如食品卫生国家标准),也有选用5—50个之间的平皿进行计数(化妆品卫生规范),同稀释度的2个平皿菌落平均数乘以稀释倍数,即为每克(或每mL)检样中所含霉菌和酵母菌数。