“黑胶虫”清除基础培养基(RPMI-1640)
概述营养成分使用方法应用 专题
中文名称 | “黑胶虫”清除基础培养基(RPMI-1640) |
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中文同义词 | “黑胶虫”清除基础培养基(RPMI-1640) |
英文名称 | Blackgel clear basal medium (RPMI-1640) |
英文同义词 | Blackgel clear basal medium (RPMI-1640) |
CAS号 | |
分子式 | |
分子量 | 0 |
EINECS号 | |
相关类别 | |
Mol文件 | Mol File |
结构式 |
“黑胶虫”清除基础培养基(RPMI-1640) 性质
“黑胶虫”清除基础培养基(RPMI-1640) 用途与合成方法
概述
“黑胶虫”及其分解复合物是一种常见的细胞污染物,与细胞共生,随细胞传代而传代,通常抗生素对其无效。“黑胶虫”与细胞竞争性生长,对细胞生长不利,严重时导致细胞死亡。目前很多细胞存在被“黑胶虫”污染的现象,对细胞培养及其后续实验造成了极大地影响。“黑胶虫”污染的细胞常见的特征有以下几点:(1)培养液不浑浊,但在显微镜下观察细胞时,细胞周围和培养液中有很多“小黑点”,且随着细培养时间的延长“小黑点”逐渐增多,更换培养液或洗涤细胞不能将其去除;(2)“小黑点”污染的细胞,营养消耗快,需要频繁更换培养液;(3)“黑胶虫”污染的细胞生长缓慢,细胞状态差,空泡化严重,甚至还可能导致细胞形态的改变。“黑胶虫”清除基础培养基(RPMI-1640)含有清除“黑胶虫”的特殊成分,对清除“黑胶虫”污染效果显著,能够很好的杀灭和抑制“黑胶虫”。
营养成分
“黑胶虫”清除基础培养基(RPMI-1640)含有多类细胞培养所需的氨基酸、维生素、无机盐等多种成分,但不含蛋白质、脂类或者任何生长因子需搭配血清和无血清添加物使用。
使用方法
1、根据所培养细胞的特性,将“黑胶虫”清除基础培养基(RPMI-1640)配制成相应的完全培养基。
2、将50~100万个细胞铺到60mm的细胞培养皿内,加入4ml“黑胶虫”清除基础培养基(RPMI-1640)孵育细胞,(也可以与细胞正常培养方法相同,直接将“黑胶虫”清除完全培养加入到培养器皿中孵育细胞)。
3、次日更换新鲜的“黑胶虫”清除完全培养基,并更换新的培养器皿;之后每2~3天更换1次培养液,换液时用无菌的平衡盐溶液洗涤细胞1~2次;期间如果细胞密度过大,请保持细胞密度适当(贴壁细胞可能需要用胰酶消化)。
4、使用“黑胶虫”清除培养基3天之后即可见清除效果,连续使用12~14天即可将“黑胶虫”清除,若“黑胶虫”污染较为严重,可延长处理3~5天。
5、因环境中可能依然存在污染源,为避免细胞再次受到“黑胶虫”的污染,建议您在“黑胶虫”清除以后继续使用“黑胶虫”清除培养基,以达到预防的效果。
应用
“黑胶虫”清除基础培养基(RPMI-1640)最初是为淋巴细胞培养专门设计的,现在已广泛应用于各种正常细胞核癌细胞的培养,尤其是悬浮细胞的培养,是使用最为广泛的培养基之一。