人细胞周期素D2(CYCLIN-D2)ELISA试剂盒
应用实验原理实验操作 专题
中文名称 | 人细胞周期素D2(CYCLIN-D2)ELISA试剂盒 |
---|---|
中文同义词 | 人细胞周期素D2(CYCLIN-D2)ELISA试剂盒 |
英文名称 | Human Cyclin D2 (CYCLIN-D2) ELISA Kit |
英文同义词 | |
CAS号 | |
分子式 | |
分子量 | 0 |
EINECS号 | |
相关类别 | |
Mol文件 | Mol File |
结构式 |
人细胞周期素D2(CYCLIN-D2)ELISA试剂盒 性质
人细胞周期素D2(CYCLIN-D2)ELISA试剂盒 用途与合成方法
应用
人细胞周期素D2(CYCLIN-D2)ELISA试剂盒用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内细胞周期素D2(CYCLIN-D2)的含量检测。
实验原理
人细胞周期素D2(CYCLIN-D2)ELISA试剂盒是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(elisa)。往预先包被人细胞周期素D2(Cyclin-D2)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人细胞周期素D2(Cyclin-D2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
实验操作
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。