实验试剂有哪些?实验室常

   2024-10-25 10
导读

  在学校、科研机构、工业等领域实验室需要用的实验试剂众多,琳琅满目,所需要采购的东西也很难一步到齐,国家标准品网这里列

      
  在学校、科研机构、工业等领域实验室需要用的实验试剂众多,琳琅满目,所需要采购的东西也很难一步到齐,国家标准品网这里列出了平常实验室常用的实验试剂目录,以供参考:
  国产和进口试剂
  乙醇、甲醇、异辛醇、丙三醇、异丙醇、正辛烷、乙二醇、正戊醇、异戊醇、甘露醇、聚乙二醇、无水硫酸钠、苯甲酸钠、碳酸氢钠、四硼酸钠、草酸钠、氟化钠、EDTA二钠、酒石酸钾钠、氯化钠、氢氧化钠、碳酸钠、十二烷基硫酸钠、氯化钾、碘化钾、硫酸铝钾、氢氧化钾、高碘酸钾、乙酰乙酸乙酯、磺胺、苯胺、间苯二胺、氨水、丙酮、丁醇、氧化铜、甲苯、锌粒、硫酸镁、氧化铝、乙酸铅、氯化钡、硝酸银、活性炭、碳酸钙、甲醛、苯酚、硅胶G、柱层析硅胶、变色硅胶、吐温、液体石蜡、四氯化碳、过氧化氢、葡萄糖、乳糖、蔗糖、酚酞、结晶紫、荧光素、碱性品红、甲酚红、刚果红、水合印三酮、铬黑T、亚甲基蓝、百里香酚酞、间苯二胺、四苯硼钠、固兰B盐、过氧化物酶、2、4二硝基苯肼、四氯化碳(色谱)、(基准)氯化钾、胃蛋白酶、蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、酵母浸粉、琼脂粉、营养琼脂、SS琼脂、虎红琼脂、麦康凯琼脂、伊红美兰琼脂、乳糖胆盐发酵  实验试剂贮液与溶液
  1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。
  1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。
  10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):将77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。
  实验室常用实验试剂10mg/ml牛血清蛋白(BSA):加100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生物学试剂级,无DNA酶)于9.5ml水中(为减少变性,须将蛋白加入水中,而不是将水加入蛋白),盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。
  1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水,分成小份贮存于-20℃。或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。 8mol/L乙酸钾(potassium acetate):溶解78.5g乙酸钾于足量的水中,加水定容到100ml。 实验室常用实验试剂1mol/L氯化钾(KCl):溶解7.46g氯化钾于足量的水中,加水定容到100ml。
  3mol/L乙酸钠(sodium acetate):溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中,用冰乙酸调溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。
  微生物学实验室常用试剂
  一、微生物学实验室用试剂诊断纸片
  ⑴ 杆菌肽纸片(0.04U/片):抑菌圈>10mm为敏感。质控菌株: D群链球菌阴性, A群链球菌阳性。
  ⑵ SMZ纸片(1.25μg/片、23.75μg/片):出现抑菌圈即为敏感。质控菌株:D群链球菌阳性, A群链球菌阴性。⑶ 新生霉素纸片(5.0μg/片):抑菌圈≥16mm为敏感。质控菌株:表皮葡萄球菌阳性,腐生葡萄球菌阴性。 ⑷ O129纸片、奥普托欣(Optochin)纸片:
  二、微生物学实验室用诊断血清
  1.沙门菌属诊断血清
  ⑴ A-F群O多价诊断血清。
  ⑵ 特异O群因子诊断血清:常用的有O2,O4,O7,O9,O10诊断血清。
  ⑶ 特异H因子诊断血清 常用的有Ha,Hb,Hc,Hd,Hgm,Hi,Hf、Vi因子诊断血清。
  2.志贺菌属诊断血清 志贺菌属4种多价血清:痢疾志贺菌Ⅰ、Ⅱ血清,福氏志贺菌多价血清及分型血清(1~6型),宋内志贺菌诊断血清,鲍氏志贺菌多价血清及分型血清。
  3.致病性大肠埃希菌(EPEC)诊断血清,产肠毒素大肠埃希菌(ETEC)诊断血清,肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)诊断血清,肠出血性大肠埃希菌(EHEC)诊断血清O157: H 7。
  4.霍乱弧菌O1、O139混合多价诊断血清及稻叶、小川、彦岛O139分型血清
  5.脑膜炎奈瑟菌多价血清及分群血清
  6.链球菌分类诊断血清
  7.肺炎链球菌诊断血清
  8.耶尔森菌诊断血清
  三、微生物学实验室常用试剂染色液
  1.革兰染色液 ⑴ 结晶紫溶液 A液:结晶紫 20g,95%乙醇20 ml; B液:草酸铵 0.8g, 蒸馏水80 ml。 染色前24h将A液、 B液混合,过滤后装入试剂瓶内备用。 ⑵ 碘液:碘1g,碘化钾2g,蒸馏水300ml。 将碘与碘化钾混合并研磨,加入几毫升蒸馏水, 使其逐渐溶解,然后研磨,继续加入少量蒸馏水至碘、碘化钾完全溶解。最后补足水量。也可用少量蒸馏水将碘化钾完全溶解,再加入碘片,待完全溶解后,加水至300ml。 ⑶ 脱色液:95%乙醇 ⑷ 复染液:沙黄2.5g,95%乙醇100ml为贮存液,取贮存液10ml,加蒸馏水90ml为应用液。
  2.抗酸染色液 ⑴ 碱性复红染色液: ①萋纳石炭酸复红溶液:碱性复红乙醇饱和溶液10ml,5%石炭酸溶液90ml。 ②脱色液:浓盐酸3ml,95%乙醇97ml。③复染液(吕弗勒美蓝液):美蓝乙醇饱和溶液30ml,100g/L氢氧化钾溶液0.1ml,蒸馏水100ml。 ⑵ 金胺O-罗丹明B染色液: ①罗丹明B液:罗丹明B 0.1g加蒸馏水100ml。②1g/L金胺O液:金胺O液0.1g加蒸馏水95ml,再加入纯石炭酸 5ml,混匀。③3%盐酸乙醇。④稀释美蓝液:吕弗勒美蓝液100ml,加蒸馏水90ml,混匀。
  3.鞭毛染色液(改良Ryu法) A液:5%石炭酸10ml,鞣酸2g,饱和硫酸铝钾溶液 10ml; B液:结晶紫乙醇饱和液。应用液A液10份,B液1份,混合,室温存放备用。
  4.异染颗粒染色液 甲液:甲苯胺蓝 0.15g,孔雀绿 2g/L, 95% 乙醇2.0ml,蒸馏水100ml。乙液:碘 2g,碘化钾3g,蒸馏水300ml。 先将碘化钾加入少许蒸馏水(约2ml),充分振摇,待完全溶解,再加入碘,使完全溶解后, 加蒸馏水至300ml。 5.荚膜染色液 ⑴ 印度墨汁或50g/L黑色素水溶液 ⑵ 5g/L苯胺蓝水溶液。
  分子实验室常用实验试剂
  1、分子实验室常用实验试剂1M Tris-HCl 组份浓度 1 M Tris-HCl (pH7.4,7.6,8.0)
  2、分子实验室常用实验试剂1.5 M Tris-HCl 组份浓度 1.5 M Tris-HCl (pH8.8)
  3、分子实验室常用实验试剂10×TE Buffer 组份浓度 100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA (pH 7.4,7.6,8.0) 菌。
  4、分子实验室常用实验试剂3 M 醋酸钠 组份浓度 3 M 醋酸钠 (pH5.2)
  5、分子实验室常用实验试剂PBS Buffer 组份浓度 137 mM NaCl,2.7mM KCl,10 mM Na2HPO4,2 mM KH2PO4
  6、分子实验室常用实验试剂10 M醋酸铵 组份浓度 10 M醋酸铵
  7、分子实验室常用实验试剂Tris- HCl平衡苯酚配置方法
  a. 使用原料:大多数市售液化苯酚是清亮无色的,无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。但有些液化苯酚呈粉红色或黄色,应避免使用。同时也应避免使用结晶苯酚,结晶苯酚必须在160℃对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物,这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致RNA和DNA的交联等。因此,苯酚的质量对DNA、RNA的提取极为重要,我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实验。
  b. 操作注意:苯酚腐蚀性极强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套及防护镜等。所有操作均应在通风橱中进行,与苯酚接触过的皮肤部位应用大量水清洗,并用肥皂和水洗涤,忌用乙醇。
  c. 苯酚平衡:因为在酸性pH条件下DNA分配于有机相,因此使用苯酚前必须对苯酚进行平衡使其pH值达到7.8以上,苯酚平衡操作方法如下: ① 液化苯酚应贮存于-20℃,此时的苯酚呈现结晶状态。从冰柜中取出的苯酚首先在室温下放置使其达到室温,然后在68℃水浴中使苯酚充分溶解。 ② 加入羟基喹啉(8-Quinolinol)至终浓度0.1%。该化合物是一种还原剂、RNA酶的不完全抑制剂及金属离子的弱螯合剂,同时因其呈黄色。有助于方便识别有机相。 ③ 加入等体积的1M Tris-HCl(pH8.0),使用磁力搅拌器搅拌15分钟,静置使其充分分层后,除去上层水相。 ④ 重复操作步骤③。 ⑤ 加入等体积的0.1M Tris-HCl(pH8.0),使用磁力搅拌器搅拌15分钟,静置使其充分分层后,除去上层水相。 ⑥ 重复操作步骤⑤,稍微残留部分上层水相。 ⑦ 使用pH试纸确认有机相的pH值大于7.8。 ⑧ 将苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。
  8、分子实验室常用实验试剂Folin试剂乙 配置方法 a.在500mL的磨口回流装置内加入钨酸钠?2水25.0359g, 钼酸钠?2水6.2526g,去离子水175mL,85%磷酸12.5mL, 浓盐酸25mL,充分混合。 b.回流10小时,再加硫酸锂37.5g,去离子水12.5mL及数滴溴。 c.然后开口沸腾15min,以驱除过量的溴,冷却后定容到250mL。 d.于棕色瓶中保存,可使用多年 注意:上述制备地Folin试剂乙地贮备液浓度一般在2mol/L左 右,几种操作方案都是把Folin试剂乙稀释至1mol/L的 浓度作为应用液,我们这时是把贮备液于使用前稀释18 倍,使之浓度为0.1mol/L略高。这种稀释18倍后的Folin 试剂乙就是上文称之为的“应用液”。Folin试剂乙贮备 液浓度的标定,一般是以酚酞为指示剂。用Folin试剂乙去滴定1mol/L左右的标准氢氧化钠溶液,当溶液颜色由红变为紫灰,再突然变成墨绿即为终点,如果用氢氧化钠去滴定Folin试剂乙,终点不太好掌握,溶液地颜色是由浅黄变为浅绿,再变为灰紫色为终点。
  9、分子实验室常用实验试剂庖肉培养基配制: (1)、取已去肌膜、脂肪之牛肉500g,切成小方块,置1000 mL蒸馏水中,以弱火煮1小时,用纱布过滤,挤干肉汁,将肉汁保留备用。将肉渣用绞肉机绞碎,或用刀切成细粒。 (2)、将保留的肉汁加蒸馏水,使总体积为2000 mL,加入蛋白胨20g,葡萄糖2g,氯化钠5g,及绞碎的肉渣,置烧瓶摇匀,加热使蛋白胨溶化。 (3)、取上层溶液测量pH,并调整其达到8.0,在烧瓶壁上用记号笔标示瓶内液体高度,121℃灭菌15min后补足蒸发的水分,重新调整pH值8.0,再煮沸10—20min,补足水量后调整pH7.4。 (4)、将烧瓶内容物摇匀,将溶液和肉渣分装于试管中,肉渣约占培养基的1/4左右。经121℃灭菌15min后备用,如当日不用,应以无菌操作加入已灭菌的石蜡凡士林,以隔绝氧气。 10. 分子实验室常用实验试剂细胞培养级玻璃器皿的洗涤处理 (1)按上述方法对玻璃器皿进行初洗,晾干。  (2)将玻璃器皿浸泡入洗液中,24~48h。注意玻璃器皿内应全部充满洗液,操作时小心勿将洗液不溅到衣服及身体各部。 (3)取出,沥去多余的洗液。 (4)自来水充分冲洗。 (5)排列6桶水,前3桶为去离子水,后3桶为去离子双蒸水。 (6)将玻璃器皿依次过6桶水,玻璃器皿在每桶中过6~8次。  (7)倒置,60℃烘干。(8)用硫酸纸包扎,160℃干烤3h。推荐阅读:化学试剂级别分类
 
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