详细说明
灵敏度、检测范围、特异性和重复性:
● 灵敏度:最小可测0.188 ng/mL。
● 检测范围:0.313–20 ng/mL。
● 特异性:可检测生物素,且与结构类似物无交叉反应。
● 重复性:板内,板间变异系数均<10%。
检测原理:
本试剂盒采用竞争法。用生物素包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的生物素与包被的生物素竞争辣根过氧化物酶标记的亲和素(Avidin-HRP)上的结合位点,生物素与亲和素特异性结合而形成复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450 nm波长处测OD值,生物素浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中生物素的浓度。
操作概要
1. 在各孔中加入标准品或样品各50 μL
2. 立即加入50 μL Avidin-HRP工作液,37℃孵育30分钟
3. 洗涤5次
4. 加入90 μL底物溶液, 37℃孵育15分钟左右
5. 加入50 μL终止液,立即在450 nm波长处测量OD值
6. 结果计算
试剂盒组成
中文名称 | 英文名称 | 规格 | 保存条件 |
ELISA酶标板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8×12 / 8×6 * | 4℃/-20℃ # |
冻干标准品 | Reference Standard | 2/1支* | 4℃/-20℃ # |
标准品&样品稀释液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL/12 mL * | 4℃ |
浓缩Avidin-HRP | Concentrated Avidin-HRP | 1支120 μL/70 μL * | 4℃(避光) |
酶结合物稀释液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 10 mL/6 mL * | 4℃ |
浓缩洗涤液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶30 mL/16 mL * | 4℃ |
底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL/6 mL * | 4℃(避光) |
反应终止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL/6 mL * | 4℃ |
封板覆膜 | Plate Sealer | 5/3张* |
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产品说明书 | Product Description | 1份 |
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质检报告 | Certificate of Analysis | 1份 |
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特别说明:
*: [96T/48T](打开包装后请及时检查所有物品是否齐全完整)
#: 一周内使用可存于4℃,需长时间存放或多次使用建议存于-20℃.
相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出!
试验所需自备物品:
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL,2-20 μL,20-200 μL,200-1000 μL
3. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
4. 吸水纸