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碧云天生产的TOP10甘油菌(TOP10 Glycerol Stock)，是收集生长在对数期的TOP10菌，加入含有甘油的细菌冻存液制备而成。本甘油菌可以直接划平板或小量、大量培养。TOP10甘油菌有时也被写作TOP 10甘油菌。

TOP10菌株来源于MC1061菌株，是目前实验室最常用的菌株之一，基因型与DH10B高度类似(DH10B为galE15型，而TOP10为galU型)。TOP10生长速度快(比DH5α快，但比Mach1-T1生长速度慢)，涂板后10小时可见菌落克隆，recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。常用于构建克隆，蓝白斑筛选等实验。

TOP10菌株基因型：F- mcrA Δ (mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80 lacZ Δ M15 Δ lacX74 recA1 ara Δ 139 Δ (ara-leu)7697 galU galK rpsL (Str^R) endA1 nupG。

本菌株可以使用常规的2YT或LB培养基进行培养。

关于碧云天不同甘油菌菌种的比较和选择，可参考我们的相关网页：http://www.beyotime.com/support/strain.htm

包装清单：    

保存条件：  
   

-20℃保存，一年有效。

注意事项：  
   

使用本甘油菌时可以不必完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加细菌的活力会逐渐下降。在没有结冻的情况下，菌体会逐渐沉淀至管底，请务必注意适当混匀后使用。

为保证菌种纯正，避免其它细菌污染，尽量先划平板然后再挑单克隆菌落进行后续操作。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：    
    1.划平板接种：    
取出甘油菌置于冰上，并置于超净台内，后续操作都在超净台内操作。    
    a.用镊子和塑料枪头操作：镊子的顶端在70%酒精中蘸一下，并且在酒精灯上略略烧一下，使镊子的顶端处于无菌状态。用镊子夹取一个无菌的200µl塑料枪头，蘸取少量甘油菌，然后把蘸有菌液的塑料枪头，以尽量和2YT或LB平板接近平行的角度，在不含抗生素的2YT或LB平板上连续作S形或Z形划动，再用一无菌的200µl塑料枪头，在原先的划线上以90º或120º角，再在2YT或LB平板上连续作S形或Z形划动。通常换枪头重复操作2-3次即可。37℃倒置培养过夜。    
    b.用接种环操作：将接种环在酒精灯上略略烧一下，使接种环处于无菌状态。微冷后，蘸取少量甘油菌，在不含抗生素的2YT或LB平板上连续作S形或Z形划动。把接种环再烧一下，微冷后，在原先的划线上以90º或120º角，再在2YT或LB平板上连续作S形或Z形划动。通常用接种环重复操作2-3次即可。37℃倒置培养过夜。    
    2.直接培养：    
取出甘油菌置于冰上，并置于超净台内，后续操作都在超净台内操作。把镊子的顶端在70%酒精中蘸一下，并且在酒精灯上略略烧一下，使镊子的顶端处于无菌状态。用镊子夹取一个无菌的塑料枪头或牙签，蘸取甘油菌，然后把蘸有菌液的塑料枪头或牙签放到装有3ml 2YT或LB的细菌培养试管内或装有100ml或更大体积2YT或LB的细菌培养瓶内。37℃，约200rpm培养10小时以上或过夜。    
    3.感受态细菌的制备：    
可以使用碧云天的    一步法感受态细菌制备试剂盒(D0301)、    超级感受态细菌制备试剂盒(D0302)进行感受态细胞的制备。    
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