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碧云天生产的EPI400甘油菌(EPI400 Glycerol Stock)，是收集生长在对数期的EPI400菌，加入含有甘油的细菌冻存液制备而成。本甘油菌可以直接划平板或小量、大量培养。

EPI400菌株来源于EC100菌株，将EC100核基因中可以提高质粒拷贝数的pcnB基因删除后插入一个诱导型启动子驱动的pcnB基因,从而构建成EPI100菌株。非诱导情况下，EPI400菌株中的质粒拷贝数低，特别适合于克隆和扩增含有不稳定DNA或毒性基因的质粒；在加入WDEPI-诱导剂I后可以提高质粒拷贝数到正常状态。[mcrA,Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)]基因型使EPI400菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA。recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。

lacZ Δ M15 标记的存在使EPI400可用于蓝白斑筛选，tonA赋予其抗噬菌体T1和T5的能力，rpsL赋予其链霉素抗性。

EPI400菌株基因型：F- mcr A Δ (mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara-leu)7697 galU galK λ- rpsL (Str^R) nupG trfA tonA pcnB4 dhfr。

本菌株可以使用常规的2YT或LB培养基进行培养。

关于碧云天不同甘油菌菌种的比较和选择，可参考我们的相关网页：http://www.beyotime.com/support/strain.htm

包装清单：    

保存条件：  
   

-20℃保存，一年有效。-80℃可以长期保存。

注意事项：  
   

使用本甘油菌时可以不必完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加细菌的活力会逐渐下降。在没有结冻的情况下，菌体会逐渐沉淀至管底，请务必注意适当混匀后使用。

为保证菌种纯正，避免其它细菌污染，尽量先划平板然后再挑单克隆菌落进行后续操作。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：    
    1.划平板接种：    
取出甘油菌置于冰上，并置于超净台内，后续操作都在超净台内操作。    
    a.用镊子和塑料枪头操作：镊子的顶端在70%酒精中蘸一下，并且在酒精灯上略略烧一下，使镊子的顶端处于无菌状态。用镊子夹取一个无菌的200µl塑料枪头，蘸取少量甘油菌，然后把蘸有菌液的塑料枪头，以尽量和2YT或LB平板接近平行的角度，在含50μg/ml链霉素的2YT或LB平板上连续作S形或Z形划动，再用一无菌的200µl塑料枪头，在原先的划线上以90º或120º角，再在2YT或LB平板上连续作S形或Z形划动。通常换枪头重复操作2-3次即可。37℃倒置培养过夜。    
    b.用接种环操作：将接种环在酒精灯上略略烧一下，使接种环处于无菌状态。微冷后，蘸取少量甘油菌，在含50μg/ml链霉素的2YT或LB平板上连续作S形或Z形划动。把接种环再烧一下，微冷后，在原先的划线上以90º或120º角，再在2YT或LB平板上连续作S形或Z形划动。通常用接种环重复操作2-3次即可。37℃倒置培养过夜。    
    2.直接培养：    
取出甘油菌置于冰上，并置于超净台内，后续操作都在超净台内操作。把镊子的顶端在70%酒精中蘸一下，并且在酒精灯上略略烧一下，使镊子的顶端处于无菌状态。用镊子夹取一个无菌的塑料枪头或牙签，蘸取甘油菌，然后把蘸有菌液的塑料枪头或牙签放到装有3ml 2YT或LB (含50μg/ml链霉素)的细菌培养试管内或装有100ml或更大体积2YT或LB (含50μg/ml链霉素)的细菌培养瓶内。37℃，约200rpm培养过夜。    
    3.感受态细菌的制备：    
可以使用碧云天的    一步法感受态细菌制备试剂盒(D0301)、    超级感受态细菌制备试剂盒(D0302)进行感受态细胞的制备。    
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