详细说明
产品描述
概述
pPIC9K载体中存在卡那抗性基因，允许利用卡那抗性在酵母体内筛选多克隆拷贝，载体其余部分与pPIC9载体完全一样。pPIC9K载体能够使用的毕赤酵母宿主菌是KM71和GS115。 pPIC9K载体详细信息如下： ? pPIC9载体大小9276 bp，是融合表达载体。 ? 载体构建过程中，可供使用的单一限制性内切酶位点为SnaB I, EcoR I, Avr II, Not I. ? 利用alpha因子分泌信号肽，分泌表达蛋白基因。 ? 在载体构建过程中，你的基因必须保证与信号肽的起始密码子的读码框一致。 ? 毕赤酵母中利用HIS4进行筛选。 ? 为了将基因插入GS115或KM71的AOX区, 使用SacI限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+Mut+基因型，KM71中产生His+ MutS基因型) ? 为了将基因插入GS115或KM71的His4区, 使用Sal I或者Stu I限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+ Mut+基因型，KM71中产生His+ MutS基因型) ? 将基因插入GS115的AOX1区域，需要使用Bgl II线性化质粒 (产生His+MutS基因型)。
技术规格
| 质粒类型 | 毕赤酵母表达载体 |
| 启动子 | AOX1 |
| 表达水平 | 高 |
| 克隆方法 | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小 | 9276bp |
| 5'测序引物及序列 | 5′ AOX1:5′-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3′ alpha-Factor-F: 5′-TACTATTGCCAGCATTGCTGC-3′ |
| 3'测序引物及序列 | 3′ AOX1:5′-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3′ |
| 载体标签 | N-alpha factor |
| 载体抗性 | 氨苄青霉素（Ampicillin） |
| 筛选标记 | HIS4 |
| 备注 | 利用alpha分泌因子，分泌表达蛋白 |
400-6226-992