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在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中 的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V 是一种分子量为 35~36kD 的 Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此 Annexin V 被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将 Annexin V 进行荧光素 APC 标记,以标记了的 Annexin V 作为荧光探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。7-AAD(7-amino-actinomycin D)是一种核酸染料,它不能通过正常质膜,随着细胞凋亡、细胞死亡过程,质膜对 7-AAD 的通透性逐渐增加,结合细胞凋亡中 DNA 的有控降解,在合适波长激发光的激发下可发出明亮的红色荧光,通过 7-AAD 标记 DNA 的强弱,将细胞分为三群:7-AAD 强为死亡细胞,7-AAD 弱是凋亡细胞,7-AAD-为正常活力细胞。7-AAD 同 PI 有着相似的荧光特性,但其发射波谱较 PI 窄,对其他检测通道的干扰更小,在多色荧光分析中是 PI 的理想替代品,可与 Annexin V- APC 联合使用。本试剂盒可应用于培养细胞凋亡检测(不推荐用于检测组织样本)。
实验类型:细胞凋亡检测
检测方法:流式分析,荧光成像
性质说明: 用流式细胞仪检测,激发波长 633nm,最大发射波长 660 nm, Annexin V-APC 的红色荧光建议使用
FL4 通道检测;激发波长 Ex=546 nm;发射波长 Em=647 nm,7-AAD 红色荧光建议使用 FL3 通道检测。
保存条件:2-8℃,保存 12个月,避光