2×TaqplusMasterMix含红色染料 1ml×5支

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产品介绍

    基本参数

    详细说明

    商品详情:

     

    2×Taq plus Master Mix含红色染料

    产品编号

    产品名称

    规格

    BL553A

    2×Taq plus   Master Mix 含红色染料

    1 ml

    BL553B

    2×Taq plus   Master Mix 含红色染料

    5×1 ml

    BL553C

    2×Taq plus   Master Mix 含红色染料

    25×1ml

    BL553D

    2×Taq plus   Master Mix 含红色染料

    100×1 ml

    注:以50μl PCR反应体系为例,1ml40PCR反应,5ml可做200PCR反应,25ml1000PCR反应,100ml可做4000PCR反应。

     

    产品简介:

    本制品是将PCR反应所需的Taq酶、dNTPsMg2+以及反应缓冲液预先配制成2倍浓度的混合物。2×Taq plus Master Mix专为常规PCR扩增反应优化,使用时只需再加入模板和引物并用水补足体系至反应浓度为,即可进行PCR反应,大大地简化了操作过程,减少了PCR操作过程中的污染。经测试,染料的加入不影响PCR反应,在PCR反应完成后可直接电泳,节省时间。使用本试剂扩增得到的PCR产物3´端有一突出"A"碱基,可直接克隆于T载体中。

    产品特点

    直接上样:含染料PCR产物可直接上样进行凝胶电泳分析;

    高度灵敏:高纯度的酶带来优良的灵敏性;

    无基因组污染:扩增产物纯度高;

    高效扩增:优化的缓冲体系发挥更强的扩增性能;

    重复性好:体系预混合,减小加样误差,降低污染机会;

    性能稳定:4℃保存3-6个月或室温(25℃)保存2-4周,反复冻融50次,扩增性能无变化;

    批次稳定:遵循标准化生产流程,经过严格的质量检测。。

    质量保证:

    经检测无外源核酸酶残留,qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。

    使用说明:

    1、冰浴中彻底融化2×Master Mix,混匀后离心快甩将溶液收集到管底。

    2、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系:


    50μl反应体系

    终浓度

    2×Master Mix

    25μl

    上游引物 10μM

    1-5μl

    0.2-1.0 μM

    下游引物 10μM

    1-5μl

    0.2-1.0 μM

    模板

    × μl

    1-30ng(质粒)

    10ng-1μg(基因组)

    补至50μl


    3、快甩离心将反应液收集到管底。

    4PCR仪如果没有热盖加热的话,补加25μl矿物油。

    5PCR仪上执行以下程序:

    步骤

    温度

    时间

    循环数

    预变性

    94

    2 min

    1

    变性

    94

    30 sec

    25-32*

    退火

    Tm-5*

    30 sec

    延伸

    72

    60s/kb

    最后延伸

    72

    5-10 min

    1

    注: PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,根据比例放大或缩小体系,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。

    6、电泳检测:含染料的2×Taq plus Master Mix可以直接上样。

    注意事项:

    1、   需要溶解完全后使用,防止离子浓度不均匀。

    2、   菌液 PCR 时预变性时间≥5min,更有利于破壁。

    3、   应根据实验目的选择合适循环数,循环数过少,会造成扩增量不足;循环数过多,扩增量增加,但突变率也会增加,并造成非特异性扩增。

    4、   根据引物 Tm 值设置合适退火温度,退火温度过低,会造成非特异性扩增;过高可能扩增不出来。

    5、   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    保存条件:

    -20保存两年有效;4稳定贮存6个月。经常使用时,一旦融化后请4贮存,尽量避免反复冻融。

    注:如保存温度长期低于-30℃或遇干冰急冻,本产品颜色会变浅直至变黄(与急冻程度相关)。经测试,该变化不影响使用效果。


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