详细说明
商品详情:
2×Taq plus Master Mix含红色染料
产品编号 | 产品名称 | 规格 |
BL553A | 2×Taq plus Master Mix 含红色染料 | 1 ml |
BL553B | 2×Taq plus Master Mix 含红色染料 | 5×1 ml |
BL553C | 2×Taq plus Master Mix 含红色染料 | 25×1ml |
BL553D | 2×Taq plus Master Mix 含红色染料 | 100×1 ml |
注:以50μl PCR反应体系为例,1ml可40次PCR反应,5ml可做200次PCR反应,25ml可1000次PCR反应,100ml可做4000次PCR反应。
产品简介:
本制品是将PCR反应所需的Taq酶、dNTPs、Mg2+以及反应缓冲液预先配制成2倍浓度的混合物。2×Taq plus Master Mix专为常规PCR扩增反应优化,使用时只需再加入模板和引物并用水补足体系至反应浓度为1×,即可进行PCR反应,大大地简化了操作过程,减少了PCR操作过程中的污染。经测试,染料的加入不影响PCR反应,在PCR反应完成后可直接电泳,节省时间。使用本试剂扩增得到的PCR产物3´端有一突出"A"碱基,可直接克隆于T载体中。
产品特点 :
直接上样:含染料PCR产物可直接上样进行凝胶电泳分析;
高度灵敏:高纯度的酶带来优良的灵敏性;
无基因组污染:扩增产物纯度高;
高效扩增:优化的缓冲体系发挥更强的扩增性能;
重复性好:体系预混合,减小加样误差,降低污染机会;
性能稳定:4℃保存3-6个月或室温(25℃)保存2-4周,反复冻融50次,扩增性能无变化;
批次稳定:遵循标准化生产流程,经过严格的质量检测。。
质量保证:
经检测无外源核酸酶残留,qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。
使用说明:
1、冰浴中彻底融化2×Master Mix,混匀后离心快甩将溶液收集到管底。
2、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系:
50μl反应体系 | 终浓度 | |
2×Master Mix | 25μl | 1× |
上游引物 10μM | 1-5μl | 0.2-1.0 μM |
下游引物 10μM | 1-5μl | 0.2-1.0 μM |
模板 | × μl | 1-30ng(质粒) 10ng-1μg(基因组) |
水 | 补至50μl |
3、快甩离心将反应液收集到管底。
4、PCR仪如果没有热盖加热的话,补加25μl矿物油。
5、PCR仪上执行以下程序:
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 2 min | 1 |
变性 | 94℃ | 30 sec | 25-32* |
退火 | Tm-5℃* | 30 sec | |
延伸 | 72℃ | 60s/kb | |
最后延伸 | 72℃ | 5-10 min | 1 |
注: PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,根据比例放大或缩小体系,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
6、电泳检测:含染料的2×Taq plus Master Mix可以直接上样。
注意事项:
1、 需要溶解完全后使用,防止离子浓度不均匀。
2、 菌液 PCR 时预变性时间≥5min,更有利于破壁。
3、 应根据实验目的选择合适循环数,循环数过少,会造成扩增量不足;循环数过多,扩增量增加,但突变率也会增加,并造成非特异性扩增。
4、 根据引物 Tm 值设置合适退火温度,退火温度过低,会造成非特异性扩增;过高可能扩增不出来。
5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:
-20℃保存两年有效;4℃稳定贮存6个月。经常使用时,一旦融化后请4℃贮存,尽量避免反复冻融。
注:如保存温度长期低于-30℃或遇干冰急冻,本产品颜色会变浅直至变黄(与急冻程度相关)。经测试,该变化不影响使用效果。