详细说明
针对种属:mouse
质粒由来源于 GeCKO (v2)库的DEDD20 nt向导RNA组成。
向导RNA指导Cas9蛋白去诱导基因组DNA中的位点专一的双链破裂(DSB)
基因的敲除或者激活可以使用 DEDD Antibody (H-4): sc-271192分析
除慢病毒激活颗粒外,其他产品均为转染即用型纯化DNA质粒。慢病毒激活颗粒预包被成慢病毒颗粒的形式,适用于难被转染的细胞
CRISPR/Cas9 KO Plasmid
Description
20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
为保证最大敲除效率,DEDD CRISPR/Cas9 敲除质粒 (m) 包含三个质粒,每个质粒都编码Cas9 核酶和 DEDD-特异性20nt向导RNA.
gRNA 序列来源于 GeCKO (v2)文库,指导Cas9蛋白去诱导基因组DNA双链中一个特异位点的断裂。
**** 注意: 这个敲除质粒没有相应的HDR质粒. **** 如果需要用嘌呤霉素筛选细胞,请选择 sc-423450-KO-2 和 sc-423450-HDR-2。
转染后,基因敲除效率可以用抗体:DEDD: sc-271192,通过WB, IF或者IHC分析
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Double Nickase Plasmids
Description
20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
DEDD 双切口酶质粒(m)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的DEDD CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
DEDD双切口酶质粒(m2)编码的成对的向导RNA与DEDD双切口酶质粒(m)的编码的向导RNA不同
转染后,基因敲除效率可以用抗体:DEDD: sc-271192,通过WB, IF或者IHC分析
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CRISPR Activation Plasmids
Description
20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
DEDD CRISPER激活质粒(m)是一种协同激活介质(SAM)转录激活系统,目的在于特定上调基因表达
DEDD CRISPR激活质粒(m)包含三种质量比为1:1:1的质粒:一种质粒编码去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A),它融合了转录活化域VP64和杀稻瘟菌素抗性基因;一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白和潮霉素抗性基因;一种质粒编码目标特定的20 nt向导RNA和嘌呤霉素抗性基因
形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域,为高效激活基因提供转录因子的招募
DEDD CRISPR激活质粒(m2)中编码特异目标的 20 nt 向导RNA的单链 gRNA (MS2) 质粒不同于DEDDCRISPR激活质粒(m)的gRNA
转染后,基因激活效率可以用抗体:DEDD Antibody (H-4): sc-271192,通过WB、IF或IHC分析
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Lentiviral Activation Particles
Description
200 µl 高滴度即用型CRISPR/dCas9慢病毒激活粒子
DEDD 慢病毒激活颗粒(m)是一种协同激活介质(SAM)转录激活系统,通过细胞慢病毒转导,特异高效地上调目的基因的表达
DEDD慢病毒激活颗粒(m)包含以下SAM激活元素:一种是去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A),它融合了转录活化域VP64;一种是MS2-p65-HSF1融合蛋白;一种是目标特定的20 nt向导RNA。它们还含有杀稻瘟菌素,潮霉素和嘌呤霉素抗性基因
一经转导,形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域,为高效激活基因,招募转录因子
DEDD 慢病毒激活颗粒(m2)中编码的特异目标的 20 nt 向导RNA的gRNA不同于DEDD慢病毒激活颗粒(m)中编码的gRNA
转染后,基因激活效率可以用抗体:DEDD Antibody (H-4): sc-271192,通过WB、IF或IHC分析
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