中文名称: 胆红素氧化酶
中文别名: 胆红素氧化酶, 10 单位/每毫克蛋白;BILIRUBIN OXIDASE 胆红素氧化酶;胆红素氧化酶;胆红素氧化酶, ≥ 50U/MG PROTEIN;胆红素氧化酶/BOD
英文名称: Bilirubin Oxidase
英文别名: BILIRUBIN: OXYGEN OXIDOREDUCTASE;bilirubin oxidase from myrothecium verrucaria;BILIRUBIN OXIDASE, FROM MYROTHECIUM SP.;frommyrotheciumspecieslyophilizedpowder0;Oxidase, bilirubin;Bilirubin Oxidase [≥50 units/mg];Bilirubin Oxidase [>=10 units/mg];Bilirubin oxidase Amano 3
CAS号: 80619-01-8
EINECS号: -
分子式: N/A
分子量: -
InChI: -
分子结构:
密度: -
熔点: --
沸点: -
闪点: -
折射率: -
蒸汽压: -
物化性质: -
产品用途:
露湿漆斑菌产生的胆红素氧化酶粗酶液通过硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow 和Sephadex G-100 纯化,得到纯化152.54倍胆红素氧化酶,得率19.14 %。
酶的分离与纯化过程为:
1)硫酸铵盐析、透析:菌种在 28℃下、P DB培养基中摇瓶培养5d后,经8 层纱布过滤,6000r/min 离心20 min ,所得上清液冷冻过夜,解冻除去沉淀, 上清液即为粗酶液。80 %饱和度硫酸铵沉淀,4℃ 静置过夜。10000r/min离心20 min,弃去上清液,沉淀溶解于蒸馏水中,对其透析过夜。
2)DEAE-Sepharose Fast Flow 柱层析:将上述所得酶液加到已用0.01mol/ L 磷酸钠缓冲液(PBS7.0)平衡过的DEAE-Sepharose Fast Flow柱(1.8 cm×20 cm), 先用PBS 洗柱,后改用含0~0.5 mol/LNaCl的PBS梯度洗脱,合并有酶活组分, 将所得溶液冷冻干燥成粉。
3)Sephadex G-100 柱层析:将上述所得活力组分的冻干粉溶解于3mL蒸馏水中,所得酶液加到平衡好的层析柱(2.0 cm×80 cm)上,用上述缓冲液洗脱,收集活力较高的组分,并将其冻干,溶解在 2mL的蒸馏水中,-20 ℃下保存。
危险品标志: -
风险术语: -
安全术语: -