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- 详细介绍
模块化照明系统具有极高的灵活性和可扩展性。
尼康Ti2-LAPP系统提供模块化照明器，用于全内反射荧光（TIRF）、光活化/转换、光漂白、落射荧光以及超分辨率显微镜（N-STORM）。每个模块都可以灵活组合，构建针对个人研究需求而优化的显微镜系统。例如，可以将多个TIRF模块合并到单个显微镜中，用于各向异性实验和快速、多角度TIRF成像。结合 TI2的 层结构，zui多可将五个照明模块合并到一个显微镜中（例如：两个TIRF、一个FRAP、一个DMD和一个Epi-FL模块都可以集成到一个Ti2上）。
主要特性
H-TIRF模块
现在可以实现全自动TIRF调整和观察TIRF观察时，不同的样品和观察条件，往往需要不同的入射角度以及激光焦点。要想实现zui佳的TIRF入射角度和焦点调节，需要操作者具备相应的技能和经验。H-TIRF模块通过监视反射光束自动调整激光的焦距和入射角，以进行TIRF观察。这种自动激光焦距调节和入射角调节是通过NIS-Elements软件中的自动准直功能进行的。用户可以保存和再现瞬逝场的入射角和穿透深度以用于后续实验，以确保一致的成像结果。
离体荧光标记微管（TRITC和Alx647标记）及微管连接蛋白（Alx488）使用内置渐变阻挡片的H-TIRF照明器并利用三个波长激光成像。多波长入射角可自动调节。
图像来源：Melissa Hendershott and Dr. Ron Vale, University of California, San Francisco
没有渐变ND滤镜，TIRF照明在FOV中显示高斯轮廓，zhong心zui亮。
使用渐变ND滤镜，可实现非常均匀的TIRF照明。
Gradation ND filter out
Gradation ND filter in
Gradation ND filter out
Gradation ND filter in
电动TIRF照明模块
通过NIS-Elements软件，可以对激光入射角以及瞬逝场的穿透深度进行调节。当使用多个TRIF照明模块时（如图），不同波长的穿透深度可以独立调节。
TIRF模块
用于观察细胞膜动力学和单分子手动TIRF模块包括渐变ND滤镜（类似于H-TIRF模块），可在整个视野范围内实现均匀的TIRF照明。使用高灵敏度相机，人们可以使用这种TIRF照明器对细胞膜内和细胞膜附近的蛋白质的单分子和动态进行成像。
N-STORM模块
实现比传统光学显微镜高10倍的分辨率从全自动到合理且电动化的运转，这些模块使用Ti2 LAPP系统使N-STORM超分辨率成像得以实现。其均配备了照明视野放大（1x、2x、4x）以及电动对准功能。使这些系统可提供近乎20nm超高的图像分辨率，达到传统光学显微镜分辨率极限的10倍或更高。
DMD模块
实现同时多点光活化DMD模块可以对用户指定的图案和位置进行光活化和光转换，而传统的FRAP单元只能对单个手动定位的点进行光活化。DMD照明的形状、大小、位置和数量可以使用NIS-Elements软件自由定制。该功能支持研究人员在单个细胞或多个细胞内光学标记细胞或蛋白质群的子集以跟踪其行为。DMD模块也非常适用于光遗传学实验，其中高度定制的ROI可用于光学诱导细胞或蛋白质群体的功能变化。DMD模块可以使用激光光源，也可以使用光毒性更小的LED光源。
Photoactivation
50 mins
63 mins
小鼠胚胎成纤维细胞共表达mCherry标记的核纤层蛋白A（红色）和可光活化的GFP标记的核纤层蛋白A。在右下区域中，它们被DMD模块和405 nm LED光转换（绿色）。时间序列图像由落射荧光照明器拍摄。通过光活化核纤层蛋白的亚群，用户可以观察它们的动力学过程和亚基交换行为。
图像来源：西北大学医学院的Takeshi Shimi博士和Bob Goldman博士
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