简介
当miRNAs与靶基因的3’ UTR结合后,主要抑制mRNA的翻译,可以Western Blot检测靶蛋白的表达水平;也有部分表现为对标靶mRNA的降解,可以采用qRT-PCR进行检测。但无论那一种方法,都不能有效说明是miRNAs直接作用的结果。直接的证据在于Sensor reporter的构建与活性检测,蓝吉生物的技术人员利用Promega特有psiCHECK质粒,对miRNAs与靶基因3’UTR的关系作出准确判断。
服务优势:
★ 采用Promega公司特有psiCHECK质粒;
★ 所采用的Luciferase双萤光报告系统,可以获得宽泛的线性定量范围与极高的灵敏度;
★ 采用瞬时转染技术,操作简便、快速,周期短,适用于绝大多数细胞类型。
服务流程:
★ PCR扩增靶基因的3’UTR,或直接合成结合位点序列(1-3次重复);
★ 将上述DNA片段克隆至报告载体psiCHECK质粒;
★ 合成miRNA 模拟物;
★ 将报告载体与miRNA模拟物共转待检细胞;
★ 多功能酶标仪检测报告基因的表达水平。
靶基因鉴定:luciferase报告基因表达载体的构建与检测,靶基因鉴定:luciferase报告基因表达载体的构建与检测
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注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途