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miRNA/LncRNA/circRNA抑制载体构建
仪器描述

        RNA干扰(RNAi)是一种RNA介导的基因沉默机制。在哺乳动物细胞中,可通过转入能与目的基因配对的双链RNA来实现,如siRNA、短发夹RNA(shRNA)。目前,主流的方法是将shRNA构建于载体中,利用细胞内的Dicer酶生成相应的siRNA,发挥RNAi的作用。一方面,shRNA慢病毒载体比体外合成的siRNA更为稳定,另一方面,经过慢病毒包装系统包装后,可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非分裂状态的细胞,并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组,进行长时间的稳定表达。

 

       原理:

       我们的RNAi抑制载体构建基于慢病毒表达系统,一般采用U6启动子驱动的pLKOG载体。

                          

      技术路线:

      1.shRNA靶点设计。

      2.慢病毒载体插入靶点基因。

      3.转化培养。

      4.克隆筛选及鉴定。

      5.无内毒素质粒提取。    

 

      客户需提供:

      1.miRNA、LncRNA、circRNA信息。如:已知NCBI编号,基因序列。

 

      我们的服务:

      1.靶点基因片段合成。

      2.载体设计。

      3.抑制构建及鉴定报告。

      4.出货质粒,甘油菌。

      5.载体更换。


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注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途

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