流式细胞凋亡

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      1、实验原理（细胞凋亡检测的方法很多，我们采用的哪种？Annexin V/PI双染法吗）

       细胞凋亡(Cell apoptosis)是指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡，亦称为程序性细胞死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同，细胞凋亡不是一件被动的过程，而是主动过程，它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用，它并不是病理条件下的损伤，而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。

       Annexin V(或 Annexin A5)为胞内蛋白膜联蛋白家族成员，以钙依赖的方式与磷脂酰丝氨酸(PS)结合。PS存在于正常细胞浆膜的内层，但在凋亡早期，膜不对称性丧失，PS 易位至细胞表面。荧光标记的 Annexin V可与之特异性结合，表明该细胞为凋亡细胞。

       机械损伤（Q1）：细胞膜破损严重，Annexin V-APC染不上。

       晚期凋亡（Q2）：细胞膜已经受损，7-AAD（ECD-A）与Annexin V-APC染料可以进入细胞内与DNA结合，不可逆转。

       早期凋亡（Q3）：细胞只有磷脂酰丝氨酸PS外翻，细胞膜完整，对7-AAD（ECD-A）拒染，可逆转

       活细胞（Q4）：对Annexin V-APC和7-AAD（ECD-A）都拒染

     2、技术应用

     检测药物、基因或蛋白等对细胞凋亡的影响。

     3、实验步骤

     1.细胞培养及种板；2.收集细胞及计数；3.孵育染料；4.流式细胞仪检测；5. Flowjo分析结果

       4、实验步骤

       客户提供：细胞株（冻存株或培养细胞）及处理用的药物，细胞培养基信息，细胞特殊处理方式

       HYY提供：原始图片、流式原始数据，完整实验报告

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