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实验原理:PI(碘化丙啶)染色特点:一是能够与双链DNA/RNA螺旋的大沟部位结合,二是不能通过功能正常的完整细胞膜。
细胞周期检测是利用与PI可以与DNA结合,其荧光强度直接反映了细胞内DNA含量。因此,通过流式细胞仪PI染色法对细胞内DNA含量进行检测时,可以将细胞周期各时相区分为G1/G0 期,S 期和G2/M 期。
细胞凋亡检测原理是在正常的活细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)位于细胞膜的内侧,但在早期凋亡的细胞中,PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ(膜联蛋白-V),能与PS高亲和力结合,可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。将Annexin V与PI联合使用时,PI 则被排除在活细胞(Annexin V-/PI-)和早期凋亡细胞(Annexin V+/PI-)之外,而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被FITC 和PI 结合染色呈现双阳性(Annexin V+/PI+)。
细胞周期检测实验流程:
细胞凋亡检测实验流程:
样品要求
处于对数生长期的细胞2*106个。
拓普生物提供:
完整的实验报告及数据处理结果(流式图、标准SCI作图等)
实验周期:4周
案例分享:
1、细胞周期
2、细胞凋亡
流式检测细胞周期和细胞亡,流式检测细胞周期和细胞亡
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