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性能
基因表达应用
BioRobot Universal System配合Application Pack, Gene Expression使用,能够对血液(收集在PAXgene Blood RNA Tubes中)、组织和细胞样本进行96孔板RT-PCR反应体系构建和自动纯化RNA。自动化的纯化流程可从血液中纯化高纯度RNA具有高重复性。
BioRobot Universal System配合RNeasy 96 Universal Tissue 8000 Kit使用能够从组织,包括裂解的脂肪和纤维组织中纯化得到高品质RNA。
应用RNeasy 96 BioRobot 8000 Kit可从细胞中纯化得到RNA。纯化流程的可靠性和效率已经过大范围的起始板量的线性CT值验证,线性范围下至10个细胞,上至5 x 105个细胞。
基因分型应用
BioRobot Universal System配合Application Pack, Genotyping使用,能够从口腔拭子或者人类全血中自动纯化基因组DNA。可以使用全自动方案从至多192个口腔拭子样本或96个人类全血样本中纯化高品质基因组DNA。自动化的纯化流程能完全消除所有污染物和酶抑制剂,纯化得到的DNA可以立即应用于高通量的基因分型应用中。CT值具有高度的可重复性,证明了该纯化方案的效率和可靠性。
自动化的PCR反应体系构建确保较高可靠性和标准化,并有助于消除因操作失误,特别是处理大量样品时产生的偏差。BioRobot Universal System可获得高度重复性的CT值,没有可检测到的交叉污染(参见下表)。
在BioRobot Universal System上自动进行扩增反应体系构建。96孔板柱包括不含RNA酶的纯水(1、3、5、7、9和11)或者4 ng不同次序的DNA模板(2、4、6、8、10、12)。用QuantiTect Probe PCR Kit、和专为β-肌动蛋白基因设计的引物和探针进行real-time PCR,获得CT 值。X:在35个循环后检测不到信号。
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | |
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
A | X | 26.1 | X | 26.0 | X | 26.2 | X | 25.9 | X | 25.8 | X | 25.6 |
B | X | 26.2 | X | 26.4 | X | 26.1 | X | 26.2 | X | 25.9 | X | 26.0 |
C | X | 26.2 | X | 26.1 | X | 26.3 | X | 25.9 | X | 26.1 | X | 26.2 |
D | X | 26.5 | X | 26.4 | X | 26.1 | X | 26.0 | X | 26.2 | X | 26.4 |
E | X | 26.3 | X | 26.3 | X | 25.8 | X | 26.3 | X | 26.0 | X | 26.2 |
F | X | 26.1 | X | 26.1 | X | 26.3 | X | 26.3 | X | 25.8 | X | 25.9 |
G | X | 26.5 | X | 25.9 | X | 26.5 | X | 25.8 | X | 26.0 | X | 26.3 |
H | X | 26.2 | X | 26.0 | X | 26.3 | X | 25.8 | X | 26.0 | X | 25.7 |
测序
BioRobot Universal System配合Application Pack, Sequencing使用,能够自动纯化质粒DNA、回收DNA和进行测序反应体系构建。使用QIAprep 96 Turbo BioRobot Kit,每次可从至多4 x 96个E. coli培养物(1–5 ml)中纯化得到分子生物学检测级别的质粒DNA 。DNA产量具有高度重复性。
使用MinElute 96 UF PCR Purification Kit的全自动化方案每次可以从至多4 x 96个样本中纯化得到PCR产物(>100 bp)。PCR产物的回收率可与手动操作流程相当,证明了全自动方案的可靠性。
Investigator应用
BioRobot Universal System配合Application Pack, Investigator使用,能够纯化法医学样本中的总DNA,包括干血、表面拭子(例如,血液、精液、唾液和上皮细胞等)、面料上的污渍(例如,血液或者唾液污染的面料等)、烟头、烟草、口香糖和信封。
使用经验证的QIAamp 96技术可进行高效纯化,并且纯化得到的DNA在敏感下游应用中表现良好,如STR分析具有高命中率。强大的纯化程序使用QIAamp 96 DNA Swab BioRobot Kit,确保过程中的安全性,并有助于防止交叉污染。
原理
BioRobot Universal System提供从不同类型样本中纯化高品质核酸的全自动纯化方案。此外,该仪器以96孔板形式进行下游反应设置。通过自动化纯化核酸和反应体系构建,BioRobot Universal System节省了手动操作时间,并且确保了高效、精简的工作流程。
每个Application Pack都提供纯化和下游反应体系构建。有4种Application Packs可用:
Application Pack, Gene Expression
Application Pack, Genotyping
Application Pack, Sequencing
Application Pack, Investigator
流程
BioRobot Universal System的自动化纯化为简单的结合、洗涤、洗脱过程。用户选择纯化实验方案,然后根据软件指导的信息完成所需的余下步骤来设置仪器。每次纯化的样本数量取决于样本类型和纯化的分析物(参见下表)。
样本类型 | 应用 | 每次纯化的样本 | 下游反应体系构建 |
---|---|---|---|
血液(收集在PAXgene Blood RNA Tubes中) | RNA纯化 | 48或者96个样本 | real-time RT-PCR;cRNA制备 |
细胞 | RNA纯化 | 96的倍数,至多192个样本 | real-time RT-PCR;cRNA制备 |
组织 | RNA纯化 | 8的倍数,24–96个样本 | real-time RT-PCR;cRNA制备 |
口腔拭子 | 基因组DNA纯化 | 8的倍数,至多192个样本 | real-time PCR:Quantifiler分析、 AmpFISTR Identifiler分析、 AmpFISTR SGM plus分析、 Picogreen 分析 |
血液 | 基因组DNA纯化 | 8的倍数,32–96个样本 | real-time PCR |
法医学样本 | 基因组DNA纯化 | 8的倍数,24–96个样本 | Quantifiler分析、 AmpFISTR Identifiler分析、 AmpFISTR SGM plus分析、Picogreen分析 |
E. coli培养物 | 质粒DNA纯化 | 32–384个样本(32倍数中32–96个样本;96倍数中96–384个样本) | 测序反应体系构建 |
扩增反应 | DNA产物回收 | 8–384个样本(8倍数中8–96个样本;96倍数中 96–384个样本) | – |
有专为病毒核酸纯化设计的实验方案,如痰、血浆、呼吸道样本和培养基中的细菌DNA;请联系QIAGEN Technical Services或当地的销售代表以获得更多信息。
应用
BioRobot Universal System适用于以96孔板形式进行中到高通量的实验室应用,如:
基因表达分析
基因分型研究
测序
法医应用
软件
QIAsoft 5是BioRobot Universal System的控制系统,提供简单的系统操作和可重复的样本处理。详细的上样检查,确保样本、试剂和实验室器具正确安装,在工作台设置过程中,有助于避免人为失误。QIAsoft 5提供便捷的用户管理,并可使用Checksum校验不恰当的修改以保护报告与结果文档。
QIAsoft 5同样也满足用户对21 CFR Part 11的技术需求。此外,由QIAsoft 5使用或者生成的文件能够用于实验室信息管理系统(LIMS)进行便捷的数据管理与兼容。QIAsoft 5内的电子表格功能为制定的应用提供便捷的移液方案。
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/注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途